離子色譜是高效液相色譜的一種,故又稱高效離子色譜( HPIC)或現(xiàn)代離子色譜。離子色譜法利用混合物中組分離子在流動相和固定相間分配系數(shù)的差別,當(dāng)離子在兩相間做相對移動時,各離子在兩相間進(jìn)行多次分配從而使各組分離子得到分離,其過程的本質(zhì)是待分離混合離子在固定相和流動相之間分配平衡的過程。然后用電導(dǎo)或紫外檢測器對分離出來的離子進(jìn)行定性檢測,再結(jié)合色譜進(jìn)行定量分析。
離子色譜儀主要由流動相傳送部分、分離柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理四大部分組成,分離原理也是通過流動相和固定相之間的相互作用,使流動相中的不同組份在兩相中重新分配。由于各組份在分離柱中的滯留時間有所區(qū)別,從而達(dá)到分離的目的。在將分離后的各個成分依次通過一高靈敏度的檢測器時就可檢測出各離子成分的濃度來,它具有高效、快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
離子色譜儀的工作原理是輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入,流動相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分被分離,并依次隨流動相流至檢測器,抑制型離子色譜則在電導(dǎo)檢測器之前增加一個抑制系統(tǒng),即用另一個高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器,在抑制器中,流動相的背景電導(dǎo)被降低,然后將流出物導(dǎo)入電導(dǎo)檢測池,檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng)記錄、處理或保存。
離子色譜儀壓力指示異常的原因:
1、恒流泵單向閥污染。如果淋洗液或水中有少量的固體雜質(zhì),有可能污染單向閥。單向閥污染后會產(chǎn)生壓力不穩(wěn)定,甚至壓力為0的現(xiàn)象。解決的方法是更換單向閥或?qū)蜗蜷y取下后清洗后再裝上。
2、六通進(jìn)樣閥堵塞。在開泵狀態(tài)下卸開每一個孔路,觀察流液情況進(jìn)行確定和相應(yīng)的沖洗處理。
3、色譜柱入口處濾膜堵塞。將色譜柱取下并擰下柱頭,小心取出其中的濾膜,放人1:1的硝酸中浸泡,超聲波清洗30min后,用去離子水沖洗后裝上;或?qū)⑸V柱反接后沖洗。此方法建議專業(yè)的人來完成,使用者不要輕易使用。
4、抑制器或電導(dǎo)池流路系統(tǒng)處有地方卡死。方法檢查色譜柱后面部分,觀察每個接頭的地方是不是有被卡死的現(xiàn)象,并做想應(yīng)的疏通處理。接頭不要卡的太緊了。
離子色譜儀的使用方法:
(1)打開鋼瓶氣源開關(guān),分壓表調(diào)到0.2-0.3(建議不關(guān)閉鋼瓶氣源);
?。?)調(diào)節(jié)減壓閥到3-6Psi左右;
?。?)依次打開SP泵、EG淋洗液自動發(fā)生器、DC色譜單元、AS自動進(jìn)樣器和VWD紫外檢測器的電源開關(guān)。
(4)如儀器長時間不使用或更換淋洗液后,要先打開平衡泵頭上的PRIME閥排氣。
(5)打開電腦,待右下角變色龍服務(wù)器圖標(biāo)變灰色后,雙擊桌面的變色龍,打開控制面板。
?。?)開泵,根據(jù)連接的柱子設(shè)定泵流速(氨基酸0.22;糖PA10:1;糖PA200:0.4;陰離子1或1.2;氫氧化鉀濃度30mM;陽離子CS18:0.25);設(shè)定柱箱溫度(30度);電導(dǎo)檢測器:根據(jù)具體的試驗條件,在控制面板DC頁面選定抑制器類型和電流;在CD頁面設(shè)定并開啟檢測器溫度。電化學(xué)檢測器:在ED頁面打開池子電壓,選擇CVMODE為INTAMP并選定波形(WAVEFORM)。
?。?)系統(tǒng)平衡
(8)編輯運(yùn)行樣品表(SEQUENCE)
?。?)系統(tǒng)平衡好后,停止采集基線,啟動樣品表,選擇要運(yùn)行的樣品表。
(10)做完樣后雙擊打開第一個標(biāo)準(zhǔn),點(diǎn)擊QNT-EDITER,進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
(11)關(guān)機(jī)。